Pambuka dhasar
Erythrocyte lysate minangka salah sawijining cara sing paling gampang lan gampang kanggo mbusak sel getih abang, yaiku, pamisah sel getih abang karo lysate, sing ora ngrusak sel nukleus lan bisa mbusak sel getih abang kanthi lengkap. Pembelahan lysate minangka cara ngilangi sel getih abang sing entheng, sing utamane digunakake kanggo pamisahan lan pemurnian sel jaringan sing disebarake dening pencernaan enzim, pamisahan lan pemurnian limfosit, lan mbusak sel getih abang ing eksperimen protein jaringan lan nukleat. ekstraksi asam. Sèl-sèl jaringan sing dipikolehi lysate saka sel getih abang ora ngemot sel getih abang, lan bisa luwih digunakake kanggo budaya utami, fusi sel, aliran cytometry, pamisahan lan extraction saka asam nukleat lan protein, etc.
Pandhuan kanggo nggunakake
Sampel sel jaringan
1. Jaringan seger dicerna dening pankreas / enzim utawa kolagenase lan disebarake dadi suspensi sel tunggal, lan supernatan dibuwang kanthi sentrifugasi.
2. Njupuk ELS lysate saka kulkas ing 4â, nambah ELS lysate kanggo sel precipitate ing rasio 1:3-5 (nambah 3-5ml saka lysate kanggo 1ml sel compacted), alon-alon jotosan lan nyampur.
3. Centrifuge ing 800-1000rpm kanggo 5-8 menit lan discard Cairan cetha abang ndhuwur.
4. Bagian endapan diklumpukake lan disentrifugasi nganggo larutan Hank utawa larutan kultur bebas serum kaping 2-3.
5, yen cracking durung rampung / rampung bisa bola langkah 2 lan 3.
6. Sel resuspensi kanggo eksperimen sakteruse; Yen RNA diekstrak, luwih becik ditindakake ing solusi sing disiapake saka Langkah 4 nggunakake banyu DEPC
Sèl getih abang duwe siklus urip sing cendhak banget, mung 120 dina, nanging bisa ngasilake getih kanthi cepet, lan ing kasus iki, dheweke bisa mbedakake sel, lan minangka sel sing paling cepet kanggo misahake kabeh, mula sel iki aji banget. dadi migunani banget kanggo kultur sel. Gampang banget, ora ana organel, mung membran sel lan protein.